Isolering af DNA fra kindceller

Du opvarmer til 100 grader for at denaturere dit DNA (adskille baseparrene), så du har to strenge. Du sænker temperaturen til 56 grader for at tillade din primer i at binde til hver sin streng og danne stabile hydrogenbinder (binde baseparrene). Jeg mener man varmer lidt op, for at give bedre mulighed for elongering. 

Hvordan du sikrer at det netop er PV92 locus? Jamen jeg håber da din primer binder specifikt til det område, altså er komplementært til dit locus, ellers kan jeg ikke lige se hvordan.... :P

Tusind tusind tak! 
Min lærer snakket noget om, at ved 56 grader nedbrydes DNA - og ved 100 grader går cellekeren i stykker, og derfor ligger vores DNA i frit væske. Men det forstod jeg slet ikke! 

Så der er ikke nogen specifikt forklaring på hvordan man sikrer man, at det er det rigtige stykke DNA, der multipliceres i PCR? 

Med Venlig Hilsen 
Mia Stolberg 

Det din lærer siger giver jo ingen mening..Først DNA og så cellekernen...? Er du sikker på du ikke har byttet rundt :P ?

Du har primer i din væske, som specifikt binder til et sted komplementært på DNA. Alt efter hvilket stykke DNA du vil have replikeret, har du en specifik primer komplementært til ønsket DNA, som kan danne grundlag for replikation af ønsket DNA.

Husk at når du opvarmer reaktionen igen, igen og igen adskiller du DNA og primer, og på den måde kan replikere det ønskede DNA mange gange, idet du har masser af primer, men begrænset DNA :) Jeg mener man kan kører op mod 30 cykler (sikkert flere).  

Tusind tak for hjælpen. Det kan være du vil hjælpe min veninde med disse to opgaver: 

- Beskriv funktionen af de enkelte reagenser i forsøget. Hvorfor er de vigtige?
- Hvordan aflæser man genotypen på gelen? Forklar

Du må være specifik. Hvilke stoffer ønsker du at vide noget om?

På en gel har du altid en kontrol med de genotyper du leder efter, så undersøger du prøven og ser om du kan finde en mønster i de undersøgte grupper og sammenholde det med kontrolgruppen, for dernæst at aflæse genotype. 

Er ikke helt sikkert, da det er en del år siden, jeg selv har lavet sådan nogle forsøg. 

Det var fin forklaret! Tusind tak 

Mvh. Mia Stolberg