Restriktionsanalyse-aflæsning

Her er den :)

Når du laver en restriktionsanalyse tilsætter du et eller flere restriktionsenzymer som genkender bestemte basesekvenser i DNA. Fordi ingen udover enæggede tvillinger har samme DNA, får man stykker af forskellig længde, hvis man undersøge forskellige personer.

Når man efterfølgende (som i figuren) laver en gelelektroforese vandrer stykkerne ned efter hvor lange de er (nu længere de er nu kortere vandrer de). Fordi man kan klippe bestemte sekvenser ud, kan det bruges til at sammenligne forskellige personer i eksempelvis faderskabsanalyser og kriminaltekniske undersøgelser. Det kan også bruges til at påvise sygdomsalleler, når længden af disse er kendt.

Betyder det så, at de andre også er klippet, men at dem, hvor der er tre streger har færre basepar grundet NF1?

Når der er 3 streger, er det fordi der er blevet lavet 3 sekvenser. Restriktionsenzymet genkender en bestemt basesekvens. Det kan fx være AATT. Hvis den ene allel kun har den basesekvens 1 gang, klippes der kun ene gang, men hvis allelen har flere AATT sekvenser klippes flere gange. Derfor opstår der et forskelligt antal stykker efter hvilken allel der er tale om.

Men hvordan kan så skelne mellem de syge og de raske? Betyder det, at de raske også har genet for NF1?

Ja. Raske mennesker har også NF1-genet. Det koder normalt for et protein ved navn neurofibromin 1. Hvis man bliver syg har man en mutation i genet, således at proteinet produceres forkert.

Ok, så de raske er heterozygot raske, men hvordan kan man så se, at sygdommen er dominant?
 

Man har i analysen kun kigget på NF1, så man har først opformeret NF1 og derefter lavet analysen.

Du kan se at de raske personer har en tyk streg. Stregen er tyk fordi alle deres sekvenser ligger der. Det tyder på at de er heterozygote. 

De syge personer har 3 streger, hvoraf den ene ligger på samme niveau som hos de raske, men er tyndere. Det skyldes at de har én allel som er den samme som for de raske og derfor klippes på samme måde. Derudover opstår de 2 andre streger fordi de også har en anden allel, som er den syge allel. Denne allel klippes over, så der opstår 2 streger. Derfor er der 3 streger i alt. Når de bliver syge selvom de har det raske gen er det fordi det syge gen er dominant. 

Jeg mente naturligvis at de raske er homozygote. :)

Tusind tak for svaret! :)