Biologi
forståelse af tekst
Dette problem blev løst af Herbert Boyer m. fl. i 1973.
Ved at anvende restriktionsenzymer som netop klipper midt i et af plasmidets resistensgener kunne de adskille baktierier med almindelige plasmider fra bakterier med gensplejsede plasmider.
Hvis alle plasmider, normale samt gensplejsede, indeholder ressistens over for ampicilin, men de gensplejsede plasmider er klippet op midt i genet for tetracylin-resisstens, bliver det muligt at identificere de gensplejsede bakterier.
alle bakterier uden plasmider vil dø, hvis de sættes til at vokse på en agerplade med ampicilin.
Hvis man derefter laver et aftryk af de overlevende bakteriekulturer og udsætter dem for tekracyklin, vil alle de gensplejsede kulturer dø.
Man kan nu gå tilbage til sin første plade med ampicilin og finde de kulturer som indeholder det gensplejsede plasmid, og opformere disse.
Mit spørgsmål er:
1. Hvad menes der med at tage et aftryk?
2.Skal teksten forståes sådan at insulingenet som insplejses midt i tetracyklin-resistens genet og derfor ødelægges dette tetracyklin-ressitente gen?
3.De bakterier med gensplejset insulin gen som ikke kan overleve ved 'fremfindingen' til disse bakteriekolnier, ved dyrkelse på tektracyklin, de dør jo, hvordan kan de så producere insulin?
Bakterien er jo død?
Svar #1
07. januar 2007 af PLO (Slettet)
Af Niels Søren Hansen og Hans Marker
Side 32.
Svar #2
07. januar 2007 af Lehatti (Slettet)
2. Ja, det må være tilfældet, så vidt jeg kan forstå ud fra det skrevne!
3. Det kan de heller ikke - på den plade, men du kan finde tilbage til de gensplejsede bakterier fra din oprindelig agarplade og derved opdyrke dem herfra.
Svar #3
08. januar 2007 af PLO (Slettet)
men hvorfor så overhovedet få de kolonier med gensplejset insulin til at dø?
for så at tage de ikke insulin gensplejsede og gensplejse dem med insulin(?)?
Er det en slags kontrol eksempel der viser at man kan kontrolere at kolonierne har fået insulingenet(derfor de døde ved pladen med tetracyklin)?
Svar #4
08. januar 2007 af Lehatti (Slettet)
Først frasorteres alle bakterierne uden plasmid. Det sker ved at dyrke dem på agarplader med ampillicin (som er et antibiotikum ala penicillin), da de jo er resistense overfor netop ampillicin.
Herefter tages et aftryk af agarpladen med gensplejede samt ikke gensplejsede bakterier hvorpå der også er ampillicin. Den plade som der tages aftryk med er en agarplade med tetracyklin. Da den genmanipulerede bakterie er klippet med et restriktionsenzym netop i det resistensgenet for tetracyklin.
Derfor dør de bakterier, der er gensplejsede (Deres resistens gen er jo ødelagt). Nu sammenligner man med den foregående plade. De hvor de døde bakterier ville være på den plade der blev taget tryk af, vil indeholde de gensplejsede bakterier, der er i dette tilfælde producerer insulin. De kan nu oprenses og vupti, du kan begynde at producere insulin.
Er det mere forståeligt? Kan ikke forklare det bedre med ord!
Svar #5
08. januar 2007 af PLO (Slettet)
De døde bakterier på ampicilinpladen?
Hvorfor? De indeholder jo ikke insulingenet, det gør de døde bakteriekolonier på agarpladen med tetracyklin?
Hvorfor skal de bakteriekolonier med gensplejset insulin dø? (man skulle jo bruge dem til at producere insulin)
Så kan det da godt være man kan tage de bakterier fra agarladen med ampicilin og gøre noget med dem, men logikken kan jeg ikke se..
I øvrigt tak for forsøget på at forklare mig det :)
Svar #6
09. januar 2007 af Lehatti (Slettet)
jeg har prøvet at illustrere det. De røde pletter er de DØDE (og dermed de gensplejsede bakteriekulturer). Stregen viser hvilke bakterier man nu kan gå tilbage og oprense, på den forhenværende ampillicin plade.
http://img219.imageshack.us/my.php?image=amptetraagarns6.jpg
Letter det forståelsen?
Skriv et svar til: forståelse af tekst
Du skal være logget ind, for at skrive et svar til dette spørgsmål. Klik her for at logge ind.
Har du ikke en bruger på Studieportalen.dk?
Klik her for at oprette en bruger.